Calcio Reactivo DIAGNO-TEST.

Calcio Reactivo DIAGNO-TEST

         (Método CPC)

 Diseñado para la determinación en suero y orina.

 El método de calcio Diagnostest es la reacción de la cresolftaleína complexona con el calcio de la muestra para formar un complejo cromogénico que es medido fotométricamente a 575 ± 5 nm. La interferencia del magnesio se previene secuestrándolo con 8-hidroxiquinolina, mientras otros metales divalentes son enmascarados con el ión cianuro.

Se utiliza 2-Etilaminoetanol para establecer un pH de 12 y el Dimetilsulfóxido para bajar la constante dieléctrica, evitando la ionización de la cresolftaleína complexona.

Reactivos:

 Reactivo N.º 1: Reactivo de Color de Calcio: Cresolftaleína complexona, hidroxiquinolina, dimetil sulfoxido y ácido clorhídrico al 0.1%.

 Reactivo N.º 2: Reactivo Buffer de Calcio: 2-Etilaminoetanol y cianuro de Potasio.

Reactivo  N.º 3: Patrón de Calcio: Carbonato de calcio en solución ácida de Ácido Nítrico.

Contenido:

1 frasco x 100ml de reactivo de color.

1 frasco x 100ml de reactivo Buffer.

1 frasco x 10ml de patrón de calcio.

Muestra:

 Suero

Orina. Diluir 1:2 con agua destilada. (El pH no debe exceder de 6,8)

Condiciones:

Longitud de onda: 575 nm.

Temperatura: Temperatura ambiente (20-25°C).

Cero: Contra Blanco Reactivo.

Observaciones:

1- Debe usarse suero ya que la mayoría de los anticoagulantes interfieren con los métodos complexo métricos.

Una vez separado el suero de las células, el calcio es estable 8 horas a temperatura ambiente, 24 horas a 4 °C y 1 año congelados.

2- Para muestras altamente lipémicas prepara un Blanco muestra como sigue:

1. a) Agregue 50 ul (0.050ml) de muestra a 4.0 ml de agua destilada.
2. b) Lea la absorbancia de este Blanco Muestra contra agua destilada a 575 ±5 nm, y réstela de la absorbancia de la muestra. Use este valor corregido para calcular el valor del calcio de la muestra.

3- Si el valor ensayado excede de 15mg/dl o la capacidad lineal del aparato, repita la prueba haciendo una dilución 1:2 (multiplicando el resultado por 2)

4- La contaminación cálcica debido a detergentes se puede evitar lavando la vidriera con Acido Clorhídrico diluido al 25%. Enjuague con agua desionizada.